威尼德双波全能型电穿孔仪Gene Pulser X2高压脉冲电穿孔仪是功能强大的将核酸、蛋白质以及其它分子导入多种细胞的技术。通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA与RNA、蛋白、糖类、染料以及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对于其它物理和化学转化方法，是一种有价值和有效的替代方法。广泛用于植物、动物和微生物的各类细胞电穿孔

1方波

　　方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时，有以下参数要进行考虑：场强、脉冲长度、脉冲个数以及脉冲间隔。

　　方波-主要用于电转哺乳动物细胞和组织，也可用于细胞融合

　　场强：两电 极间的电压大小，用Kv/cm表示，场强改变一般通过调整脉冲电压或电 极间距来实现。

　　细胞类型、场强范围、细菌/酵母3-24 kV/cm、哺乳动物细胞、0.25-3 kV/cm、　植物

　　3-12 kV/cm

　　 脉冲长度：单个脉冲持续的时间，脉冲长度与细胞膜穿孔保持开放的时间紧密相关，如时间太长则导致孔径无法恢复；如时间太短则外源物质无法通过细胞膜。

　　脉冲个数和间隔：是指脉冲的个数以及每两个脉冲之间的间隔。有时为达到优化的分子传递效果，我们可以采用多脉冲。

2 指数衰减波

　　指数递减波脉冲是先对电容充电，然后让电容完全放电，其电压变化呈指数递减。一般这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。选择指数衰减波时，有以下参数要进行考虑：场强、电容、电阻、时间常数。

　　指数衰减波-主要用于电转细菌，酵母，植物（有细胞壁的细胞），有时候对一些哺乳动物细胞也适用

　　场强：同方波。

　　电容：容纳电场的能力，用uF表示，释放能量的大小可通过调节电阻来实现。一般我们采用高电压，低电容或低电压，高电容。

　　时间常数：指数衰减波的脉冲长度，用RC表示，为电阻与电容的乘积。指数衰减波时间常数越大，衰减的越慢，反之则越快。

　　电阻：阻碍电流的能力，有时又内部电阻和外部电阻之分，如BTX电路则是内部样品电阻与外部设置电阻进行并联，通过调整外部电阻进而来调节总电阻，进而调节脉冲时间。

　　Part 3 方波与指数衰减波之间如何转换？

       如果你查阅文献，只发现有指数衰减波的参数，而你想尝试方波，那怎么办呢？接下来让我们看看这两种波形如何转换吧。

　　从指数衰减波转换为方波：保持电压/电 极间隙/脉冲时间/脉冲间隔不变；

　　无需设置电容和电阻参数

　　脉冲长度为指数衰减波时间常数的一半

　　从方波转换为指数衰减波：保持电压/电 极间隙不变

　　通过调整电阻和电容使时间常数为方波脉冲长度的2倍，

　　注意：这些转换都是理论上的，通常方波对哺乳动物细胞更有效，指数衰减波对细菌/酵母更有效。